高中生物选修一《生物技术实践》超全笔记

一、传统发酵技术

1.果酒制作：

1）原理：酵母菌的无氧呼吸 反应式：C6H12O6 2C2H5OH+2CO2+能量。

2）菌种来源：附着在葡萄皮上的野生酵母菌或人工培养的酵母菌。

3）条件：18-25℃，密封，每隔一段时间放气（CO2）

4）检测：在酸性条件下，重铬酸钾与酒精反应呈灰绿色。

2、果醋制作：

1）原理：醋酸菌的有氧呼吸。

O2，糖源充足时，将糖分解成醋酸

O2充足，缺少糖源时，将乙醇变为乙醛，再变为醋酸。

C2H5OH+O2CH3COOH+H2O

2）条件：30-35℃，适时通入无菌空气。

3、腐乳制作：

1）菌种：青霉、酵母、曲霉、毛霉等，主要是毛霉（都是真菌）。

2）原理：毛霉产生的蛋白酶将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和aa ；脂肪酶将脂肪水解为甘油和脂肪酸。

3）条件：15-18℃，保持一定的湿度。

4）菌种来源：空气中的毛霉孢子或优良毛霉菌种直接接种。

5）加盐腌制时要逐层加盐，随层数加高而增加盐量，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。

4、泡菜制作：

1）原理：乳酸菌的无氧呼吸，反应式：C6H12O62C3H6O3+能量

2）制作过程：①将清水与盐按质量比4：1配制成盐水，将盐水煮沸冷却。煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响。②将新鲜蔬菜放入盐水中后，盖好坛盖。向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证乳酸菌发酵的无氧环境。

3）亚硝酸盐含量的测定：

①方法：比色法；

②原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

二、微生物的培养与应用

1、培养基的种类：按物理性质分为固体培养基和液体培养基，按化学成分分为合成培养基和天然培养基，按用途分为选择培养基和鉴别培养基。

2、培养基的成分一般都含有水、碳源、氮源、无机盐P14

3、微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。

4、培养基还需满足微生物对PH、特殊营养物质以及O2的要求。

5、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。

6、常用灭菌方法有：灼烧灭菌，将接种工具如接种环、接种针灭菌；干热灭菌：如玻璃器皿、金属用具等需保持干燥的物品。高压蒸汽灭菌：如培养基的灭菌。

7、用固体培养基对大肠杆菌纯化培养，可分为两步：制备培养基和纯化大肠杆菌。

8、固体培养基的制备：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板

9、微生物常用的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。

10、平板划线法是通过连续划线，将菌种逐步稀释分散到培养基表面，稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释，分别涂布到培养基表面。当它们稀释到一定程度后，微生物将分散成单个细胞，从而在培养基上形成单个菌落。

11、微生物的计数方法：活菌计数法、显微镜直接计数法、滤膜法。

12、活菌计数法就是当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少个活菌。统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察的只是一个菌落。

13、显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法，但它包括了死亡的微生物。

14、设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响。提高实验结果的可信度。①如何证明培养基是否受到污染：实验组的培养基中接种要培养的微生物，对照组中的培养基接种等量的蒸馏水（设置空白对照）。②如何证明某选择培养基是否有选择功能：实验组中的培养基用该选择培养基，对照组中培养基用普通培养基（牛肉膏蛋白胨培养基）。如果普通培养基的菌落数明显大于选择培养基中的数目，则说明该选择培养基有选择功能。

15、如何分离分解尿素的细菌？培养基中以尿素为唯一氮源，加入酚红指示剂，如果PH升高，指示剂变红，可初步鉴定该菌能分解尿素。

16、如何分离分解纤维素的微生物？以纤维素为唯一碳源的培养基。

17、纤维素酶是一种复合酶，至少包括三组分：C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。

18、筛选纤维素分解菌的方法：刚果红染色法，其原理是刚果红可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。（产生了透明圈，说明纤维素被分解了，说明有纤维素分解菌）

三、植物组织培养

1、菊花组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。

2、常用的培养基是MS培养基：主要成分包括：大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S；微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co；有机物：如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素以及蔗糖等，常常还要添加植物激素。

3、生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键激素。

1）按照不同的顺序使用，会得到不同的实验结果。

①先使用生长素，后使用细胞分裂素：有利于细胞分裂，但细胞不分化；

②先使用细胞分裂素，后使用生长素：细胞既分裂也分化。

③同时使用：分化频率提高。

2）两者用量的比例影响细胞的发育方向：

4、花粉是单倍体的生殖细胞，花粉的发育要经历小孢子四分体时期，单核期和双核期等阶段。

5、通过花药培养产生花粉植株（单倍体植株）一般有两种途径：

究竟是哪种途径主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比。

6、影响花药培养的因素：材料的选择和培养基的组成，此外，亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度等都有影响。

7、月季的花药培养一般选初花期，并且选择单核期的花粉。选择花药时，一般通过镜检来确定花粉是否处于适宜的发育期。确定花粉发育时期的常用方法：醋酸洋红法，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青——铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。

四、酶的研究与应用

1、果胶酶作用：分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，提高水果的出汁率，并使果汁变得澄清。

2、果胶酶并不特指某一种酶，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。

3、酶的活性可用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。

4、目前常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶，其中应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。

5、加酶洗衣粉的作用原理：碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污迹容易从衣物上脱落。同样道理，脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质。

6、固定化技术包括：包埋法、化学结合法和物理吸附法。一般来说，酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化，而细胞多采用包埋法固定化。因为细胞个大，而酶分子很小；个大的细胞难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中漏出。

7、固定化酵母细胞时，酵母细胞的活化用蒸馏水；配制海藻酸钠溶液时，加热要用小火，或者间断加热；要将海藻酸钠溶液冷却至室温，再加入活化的酵母细胞。CaCl2溶液有利于凝胶珠形成稳定的结构。

五、DNA和蛋白质技术

1、提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。

2、DNA溶解性：①DNA在不同浓度的NaCL溶液中溶解度不同。在0.14moL/L的NaCL溶液中，溶解度最小。②DNA不溶于酒精。

3、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性：因为酶有专一性，蛋白酶能水解蛋白质，但对DNA没有影响。DNA比较能耐高温。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA无影响。

4、在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。

5、提取DNA的材料一般用鸡血而不用猪血，因为哺乳动物（猪）成熟的红细胞无细胞核，无DNA。

6、破碎鸡血细胞时，可以加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。

7、为了纯化提取的DNA，需要将滤液进一步处理。在滤液中加入NaCL，使其浓度为2mol/L，过滤除去不溶的杂质，再加入蒸馏水，使NaCL浓度为0.14mol/L，析出DNA，过滤除去溶液中的杂质。

8、向溶解了DNA的NaCL溶液中加入体积分数为95%的冷却的酒精溶液，目的是提取含杂质更少的DNA。

9、PCR原理：DNA体外复制

10、PCR的条件：①一定的缓冲溶液；②DNA模板；③分别与两条模板链相结合的两种引物；④四种脱氧核苷酸；⑤耐热的DNA聚合酶；⑥控制温度的仪器设备。

11、为什么要引物？因为DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链。DNA的合成方向总是从子链的5′端向3′端延伸。

12、PCR三步骤：变性、复性和延伸。在PCR循环之前，常要进行一次预变性，以便增加大分子模板DNA彻底变性的概率。

13、PCR的结果：特异地复制处于两个引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。

14、DNA在260nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰。

15、蛋白质分离的方法：凝胶色谱法和电泳。

16、凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量较小的蛋白质，移动速度慢，后洗脱出来；相对分子质量较大的蛋白质，移动速度快，先洗脱出来。

17、电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小形状的不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现各种分子的分离。

六、植物有效成分的提取

1、植物芳香油的提取方法：蒸馏、压榨和萃取。

2、水蒸汽蒸馏法是利用水蒸汽将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后又重新分出油层和水层。如玫瑰油、薄荷油等（也可用萃取法）。

3、柑橘、柠檬芳香油的制备常使用压榨法，因为水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解。

4、胡萝卜素的提取一般用萃取法。萃取法是将粉碎、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡，使芳香油溶解在有机溶剂中，然后蒸发出有机溶剂，获取纯净的植物芳香油。

5、石油醚具有较高的沸点，能充分溶解胡萝卜素，并且不与水混溶，所以适宜用作胡萝卜素的萃取剂。

6、玫瑰精油的化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸汽一同蒸馏。故适用于蒸馏法。

7、玫瑰精油的油水混合物中加入NaCL目的是增加水层密度，使油水分层。分离油层后加无水Na2SO4，目的是除去水，再过滤去除Na2SO4。

8、橘皮压榨前用石灰水浸泡，目的是破坏细胞结构、分解果胶、防止橘皮压榨时滑脱，提高出油率。

9、胡萝卜素是橘黄色结晶，化学性质比较稳定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂，所以适于用萃取法。

10、萃取时采用水浴加热，以防有机溶剂燃烧、爆炸。瓶口安装回流冷凝装置，以防止加热时有机溶剂挥发。

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实习笔记丨章可沁——感悟心灵，实践青春

在共青团谷城县委办公室为期一个月的实习结束了，在领导们的悉心指导和同事们的热情帮助中，我认真学习了政府机关的工作要求，比较顺利地上手了团县委的日常工作，并亲身参与了多项暑期活动筹备事宜，包括县少先队辅导员培训班、希望家园、疫情防控和其他志愿活动。下面分两个部分讲述我的实践心得。

我在办公室的日常工作大多以文书为主，比如来文登记、会议记录、数据汇总等。相较于其他工作来说，这些文书任务繁琐但并不困难,但寻常处见功力,细微处见真章，只有重视细节才能将这项工作做好，对此我有以下四点体会：

第一，工作态度必须严谨细致，对一切事情都认真负责、一丝不苟、精益求精，于细微之处见精神，于细微之处见境界，于细微之处见水平。比如填报财务数据时，不同的表格有不同的计算方式、金额单位，还要确认填报的行列是否出错，这些都不是需要绞尽脑汁才能完成的工作，但一不小心就会出错；我在反复验算的过程中就发现了几处错漏，有忘算平均数的，有忘标小数点的，好在都及时发现并补救了回来。所以无论做什么工作都不能心浮气躁、好高骛远，哪怕是再简单的小事也要认真仔细，避免出现错误。

第二，不要畏惧开口询问。我不大擅长与人交往，所以有什么问题更倾向于自己解决。可这种行事风格在熟悉的领域还好，进入陌生的领域就很容易傻眼。刚到谷城实习时，我这也不懂那也不会，好在有领导和同事们的帮助，这才慢慢熟悉了流程；不过遇到问题的时候还是会下意识地退缩，不敢提问，总担心给别人添麻烦。但换个角度想，如果因为自己胡乱解决问题而导致了更大的错漏，那才是真给单位添麻烦。所以不能有畏惧心理，有疑问就应该直接提出来，有不清楚的地方一定要弄清楚，要以开放的态度迎接问题。

第三，好记性不如烂笔头，这是可以从学习生活延续到工作生涯的优良传统。无论是开会还是领导分配工作，带上纸笔，及时记录，这是防止自己忘事的最有效手段；把接下来要做的事列在本子上，这一阶段的工作就一目了然了。我还简单记录了每天的工作情况，这篇实践心得就可以说是建立在这份记录的基础上完成的。

第四，做事要有计划。什么时间该做什么事，达成什么样的目标，要先有这样的计划，才有明确的方向。我很喜欢团县委这种开会时明确提出下一阶段的工作，然后具体分配任务到责任人，并给出工作期限的流程，既明确节奏又留有余地。自己工作时也要有计划，分清任务的轻重缓急，提高做事的效率和工作的有序程度，避免工作出现缺乏逻辑和系统性的问题。

在办公室工作中，我面对的最大困难就是不懂方言。有一次，我独自留守办公室，恰好有其他部门打电话来催交报告；由于对方言的不熟悉，我反复询问了三四次具体是什么报告，才勉强听懂了。在平时的工作中，也因为这个原因，会需要领导和同事们再三重复才能接收消息，拖慢了工作效率。包括后来上门入户对外来人群进行排查，开展疫情宣传和登记，也需要反复询问居民信息，也因交流困难造成延误。在这次实习中，方言是我始终没能克服的难点。这也给我带来了一些思考，比如以后的正式工作也该提前思考语言问题；以及面临这种短时间内无法适应的问题应该如何应对等。不论如何，首先得放平心态，心平气和地解决问题，越急越容易出错；其次，如果是无法改变的环境问题，就应该积极改变自己，比如努力去学习方言，起码能听懂，让自己尽快融入环境。

所谓“世事洞明皆学问，人情练达即文章”

实习中丰富多彩的实践活动令我大开眼界

参与组织志愿活动也让我有所成长

实习期间，我参观参与了很多实践活动，真的非常感谢领导们能在各种活动中带上我。刚到谷城第一天开工作会的时候，周清源书记就特地点名安排我参与包括谷城县少先队辅导员培训班、希望家园、希望工程助学等在内的多项活动组织，我当时既欣喜又惶恐；能参与活动固然是开心的，但自己对团的工作还不熟悉，只怕给大家添乱，虽然翻看了“青春谷城”的微信公众号上的相关推文，却也没有实感。在我亲身参与之后，我对这些活动的意义有了更加深刻的理解。

实习的第二天，在送大学生志愿者们去盛康镇的小沟小学和甘坪小学开展希望家园活动时，我确确实实感受到了这项活动的意义所在。在我的成长环境中，几乎没有面临过像这些留守的孩子们一样的困境，也很少能体会到相对偏远地区这样教育资源不足的困窘。诚然，这两所学校虽然偏远，但基础设施都很完善，我相信在平时的学习中也能给学生提供平均水准上的教育；可在假期，这些孩子们就不像我成长环境中那样，有家长的陪伴或者能花钱去上个培训班。在这种情况下，希望家园能很好的解决暑期留守儿童的监管问题，也能让孩子们感受到身边的关爱，还能给孩子们拓展一些平时课本上没有的知识可以说是一举多得，是真正为群众办实事。

在参加完城关镇黄康社区的希望家园开班仪式之后，我的体会更加深刻；当仪式结束时，我询问了等在门外的家长对这个活动的看法，她们脸上洋溢着的笑容和脱口而出的“好”，传达着大家对“希望家园”活动的喜闻乐见。听到这个回答时，连我这个没参与过前期准备工作的实习生都与有荣焉。“我为群众办实事”，从来不是一句停留在嘴上的口号，而是在仔细分析当前存在的问题的基础上，给出解决问题的方案，并切切实实地落实到位。有没有真正做到这一点，人民群众会给出最真实的回应。

实习中期，我参与筹备了县少先队辅导员培训班，培训班中，既有学习党史、赓续红色血脉的部分，也有实地调研、参观学习先进单位的部分。虽然我一开始对于少先队的工作可谓是一无所知，但通过这一次的培训班也略懂了些许皮毛。少先队是建设社会主义和共产主义的预备队，引领少先队是共青团的一项重要工作；而少先队辅导员就是少先队员最直接、最亲密的指导者，少先队开展工作、组织活动都离不开他们。因此，对少先队辅导员组织培训也是保持红色和先进性的一种手段。当下的国际形势并不乐观，我们也一直面临着很多基于试图和平演变我国政治形态而诞生的言论，试问谁小时候没听过中日夏令营、德国下水道之类的小故事呢？在这种情况下，抓好少年儿童的意识形态、思想教育就是重中之重的大事。在确保大方向正确的基础上，各个学校的少先队也要基于自身情况开展不同的活动以紧紧团结少年儿童，引领他们听党话、跟党走。

作为一名青年志愿者，我参与了上门入户宣传疫情防控、疫苗接种和反电诈的社区活动。因为疫情原因，我们的实习提前结束了，很遗憾没能参与原计划中下乡入户的希望工程助学活动；但这一临时组织的活动，也算填补了空缺。这是我第一次以工作人员的身份与社区居民面对面；遥想去年疫情爆发时，我所在的小区也有社区工作人员挨家挨户上门登记信息，能体会到这种身份的对调也是一种特殊的体验。这次工作最大的困难有两点，一是天气炎热，二是听不懂方言；关于方言的部分前面已经说过了，这里不再详述。当时气温比较高，还穿着志愿服务的马甲，确实非常热，所以一开始是有一点不情愿的；等到挨家挨户敲门的时候，大家都非常耐心地配合我们的工作，还有居民送水或者邀请我们进屋里凉快凉快，他们的热情切切实实的感染了我，这种想放弃的情绪倏忽就散了。即使有时候语言不通，但我感觉我们的心是贴近的，虽然身体很疲惫，但心情却非常好。而且这个活动也很大地改善了我不善与人交往的缺点。

此次实习我还参与组织了一次志愿活动。以前在学校里参加活动，无非是纯粹的参与者，或者帮忙打打下手，亦或者是组织几个人的小活动；这是我第一次比较正式地参与组织大型志愿服务活动。与单纯参与或打下手不一样，组织者需要承担更大更多的责任，有很多事情需要沟通协调，属于比较繁琐且需要动脑的工作。不得不说，看着一个想法逐渐成型，慢慢有了完善的计划，最后把它付诸实践的过程着实令人心情愉悦。尽管中途我也有很多困惑和疑难，比如反复与负责人沟通、协调各方、第一次写活动方案等带来的畏难情绪，但最后都一一克服了。这样的活动策划，给我带来了一次扬弃的蜕变。其实很多时候畏惧的心理都来自不了解和不熟悉，切实体会、经历过后再往回看，就会发现当时觉得跨不过去的高山只是一个小土堆而已。当然，这次活动能成功，我的工作只是小头，主要还是因为有其他负责人的贡献；个人的力量会存在不足，但团结永远是制胜的良方。

总而言之，通过这次实习，我学到了许多书本上没有的知识和能力，有机会将理论与实际结合起来，可以说是受益匪浅；同时也发现了自己身上的一些不足之处，比如理论知识水平不足，出现问题时单独处理能力不够强等。希望在以后的学习工作生涯中可以克服这些缺陷，向更高水平进发。

团务百科系列

中学团校建设管理制度

组织管理制度

（二）工作机构 校外师资队伍可邀请其他学校党政领导、各级党校和团校教师、高校教师、社会工作者、青少年工作者、“道德模范”“青年五四奖章”获得者、“优秀共青团干部”“优秀共青团员”“向上向善好青年”、各级团组织相关负责人等到中学讲团课或者交流。

荣誉出品丨共青团谷城县委

本期编辑丨谷小青

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